亲和层析填料

亲和层析填料：亲和层析是基于生物分子与其他配基分子之间(如抗原与抗体、酶与底物、激素与受体、核酸中的互补链、多糖与蛋白复合体等)的特异性吸附原理建立和发展起来的。通过介质上的配基与目标分子之间的特异性吸附来实现纯化目标分子的目的。由于这种特异性的作用力，亲和层析具有高度选择性、高活性回收等特点。

1. His标签蛋白

过渡态金属离子(Cu2+>Ni2+>Zn2+>Co2+)能够与电子供体，如N、S、O等原子以配位键结合，金属离子上剩余的空轨道是电子供体的配位点，在溶液中会被水分子或阴离子占据，当蛋白质表面氨基酸残基(His)与金属离子的结合力较强时,氨基酸残基的供电原子就会与金属离子结合形成复合物，取代原先结合的水分子或阴离子，这样就能使蛋白质分子结合在固体表面。His标签蛋白的His和介质结合，由于蛋白质表面的氨基酸的种类、数量、位置和空间构象不同,因而具体使用时根据金属配基的亲和力大小不同，选择不同的金属配基进行分离纯化。

★螯合离子(和His结合力)Cu2+>Ni2+>Zn2+>Co2+,其中:Cu2+结合力强,Ni2+常用,Co2+结合力较弱而分辨率高。

根据螯合方式不同，又分为IDA,IMAC,TED三种。

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2. GST标签蛋白

GST能特异的与GSH结合，表现为酶和底物的作用原理,利用这个原理，将GST做成标签表达出融合蛋白，与GSH配基的亲和介质特异性结合，从而纯化出目标蛋白。GST融合蛋白纯化的特点是:纯度高,纯化条件温和保持蛋白活性，促进蛋白可溶性表达等。

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3. C3H7NO3蛋白酶

C3H7NO3蛋白酶纯化亲和介质，是将C3H7NO3蛋白酶的广谱抑制剂对氨基苯甲醍偶联在琼脂糖微球Focurose FF和高强度交联的琼脂糖Focurose 4FF制备而成，称为Benzamidine Focurose FF(LS)和Benzamidine Focurose 4FF(HS)。

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4. Protein A/Protein G

将Protein A和Protein G等物质偶联在高强度交联琼脂糖上，广泛用于抗体的纯化。

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5. Plasmid

质粒DNA是一类能在细菌染色体外自主复制的环形双链DNA分子。不同类型的质粒DNA分子量大小不同,大的可达到10^5kDa,小的则仅为10^3kDa左右。质粒DNA的构型一般分为超螺旋、幵口环状或线性3种，此外它们各自还可能会形成聚体。初步纯化的质粒DNA溶液中常混有3种构型，并且掺杂一定量的蛋白质、RNA、内毒素以及宿主基因DNA,这些杂质会影响后续的应用，因此质粒DNA需要进一步精细纯化。我公司具备成熟的质粒纯化整体解决方案（三步法、两步法）和产品服务。Plasmid系列填料纯化原理是利用配基的嗜硫吸附，适用于分离纯化闭环的超螺旋质粒DNA。

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6. 预活化

预活化介质也称为亲和介质活化中间体，是在各种交联强度琼脂糖的基础上,通过不同的偶联方法键合上不同的活性基团（活性间隔臂）。通过活性基团可进一步偶联各种配基，用于制备其它介质（主要是亲和介质）及固定相应物质,用户可根据自己需求把待偶联的配基很容易地偶联上去，避免了前期接活性基团的繁琐工序。

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