当前位置:首页 > 产品中心 > > 免疫细胞培养基添加物 > 人T细胞活化扩增培养试剂盒
产品分类
相关文章
详细介绍
货号 | CS-20004-50 | 规格 | 1 kit |
---|---|---|---|
供货周期 | 现货 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,制药,综合 |
人T细胞活化扩增培养试剂盒是为在体外活化和扩增人T细胞而专门设计的一款含血清培养基套装。该培养试剂盒可高效活化人幼稚CD4+T或CD8+T细胞,并且达到高效扩增的目的,是研究人T细胞分化和功能的重要培养系统。
产品特点
针对人T细胞的活化和扩增而设计
产品成分
产品名称 | Cat log # | 规格 | 储存条件 |
人T细胞活化扩增培养试剂盒 | CS-20004-50 | 1 kit | |
人T细胞基础培养基 | CS-20004-B | 50ml | 4℃ |
人T细胞活化补充因子 | CS-20004-ATS | 0.35ml | 4℃ |
人T细胞扩增补充因子 | CS-20004-EXS | 0.4ml | -20℃ |
预筛选T细胞专用胎牛血清 | CS-TF-5 | 5ml | -20℃ |
其他本试剂盒未提供但需用的重要试剂和组分
人T细胞磁珠分选试剂
*培养基配制
(在无菌生物安全柜中,开展以下操作)
1.在4℃冰箱解冻补充因子和胎牛血清,混匀后使用。
注:解冻后的补充因子和血清可放置于4℃冰箱,在1个月内使用;或者分装至合适体积后,保存于-20℃冰箱,不可反复冻融!2.活化培养基配制:将1体积的活化补充因子和4体积的胎牛血清加入到35体积的基础培养基中,充分混匀,得到人T细胞活化培养基。如取100ul补充因子和400ul胎牛血清加入至3.5ml基础培养基,以此类推。
扩增培养基配制:将1体积的成熟补充因子和10体积的胎牛血清加入到89体积的基础培养基中,充分混匀,得到人T细胞扩增培养基。如取100ul补充因子和1ml胎牛血清加入至8.9ml基础培养基,以此类推。
注:配好的*培养基请于4℃保存,且于1个月内使用完毕。使用说明
(请详细阅读使用说明后再开始相关实验)
1.使用磁珠分选人外周血单个核细胞中T细胞(参考所使用试剂盒的说明书),计数。
注:健康供体每1ml外周血中约含有5-10*10^5 T细胞。2.D0:使用活化培养基重悬T细胞,调整细胞密度至1*10^6/ml,按照如下表格所示将细胞铺于培养板:
培养板 | *培养基体积 | T细胞数/孔 |
96孔板 | 0.2ml | 0.2*10^6 |
24孔板 | 1.0ml | 1.0*10^6 |
3.将培养板置于细胞培养箱,37℃,5%CO2,静置培养。
4.D2:补充1/4初始培养体积的新鲜活化培养基(参考步骤2表格)。
注:*培养基请恢复至室温后使用,减少对细胞的刺激。5.D3:扩孔。
1)收集细胞,离心去除活化培养基,使用扩增培养基重悬,计数;
2)调整细胞密度至5*10^5/ml,按照如下表格将细胞铺于培养板,继续扩增培养T细胞:
培养板 | *培养基体积 | T细胞数/孔 |
96孔板 | 0.2ml | 1*10^5 |
24孔板 | 1.0ml | 5*10^5 |
6.D5/D7:细胞计数,按照步骤5所示进行细胞扩增,或收集细胞进行后续操作和分析。
数据展示
图:人T细胞活化扩增培养鉴定。分选的人CD4+T细胞按照试剂盒说明活化后第三天,显微镜下观察克隆形成(A);分选的人CD4+T和CD8+T细胞按照试剂盒说明培养至图示天数,收集细胞计数计算扩增倍数(B)
产品咨询